鉴别玛瑙手串的真假可以用肉眼看、用小刀划，以及用手掂量分量，天然玛瑙色彩层次分明，透明度有些混沌，被刀子划后不会刮花，拿到手里掂量有下坠感。而人工玛瑙条纹均匀不自然，透明度很好，能被刀子刮花，并且拿在手里轻飘飘的。
天然玛瑙的色彩层次分明，条带非常明显，有密集排列的红色斑点，并且透明度有些混沌，看得见自然水线或者“云彩”。而假玛瑙的条纹均匀不自然，透明度会很好，就像玻璃球一样。
天然玛瑙的硬度高，所以用刀子划一下不会留下刮花的痕迹，而人工玛瑙会有明显的划痕。也可以在硬的木板上用力摩擦几十下，天然玛瑙会导致木板发热，人工玛瑙则不会。
天然玛瑙往往比假玛瑙更加有分量，更有沉重感，所以将玛瑙拿到手里掂量，天然玛瑙会有一种下坠感，而假玛瑙会显得轻飘飘的。另外，天然玛瑙摸着十分舒服，冬暖夏凉，而人工玛瑙在天热时摸着热，天冷时摸着冰。
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